W filmie Christophera Nolana Mroczny rycerz (The Dark Knight) w rolę nowego Jokera wcielił się Heath Ledger. W wywiadzie dla The New York Times Ledger opisał swoją postać jako: "psychopatycznego wielokrotnego mordercę, schizofrenicznego klauna, pozbawionego empatii"[10]. W przeciwieństwie do poprzednich filmowych wcieleń, gdzie skóra została wybielona chemikaliami, w tym filmie ma przefarbowane włosy na zielono oraz rozmazany biało-czarno-czerwony makijaż, który częściowo zakrywa blizny po rozciętych ustach. W trakcie filmu Joker podaje sprzeczne historie, w których wyjaśnia skąd ma swoje blizny. Najpierw opowiada, że blizny są wynikiem przemocy ze strony ojca alkoholika, a później samookaleczenia. W Mrocznym rycerzu nie pojawia się motyw trucizny Jokera, zaś jego ulubioną bronią są noże, broń palna i ładunki wybuchowe.
Pod koniec Batman: Początek (Batman Begins) porucznik James Gordon (Gary Oldman) wręcza Batmanowi (Christian Bale) kartę Jokera, pozostawioną na miejscu zbrodni przez nieznanego sprawcę. Kilka miesięcy później dochodzi do napadu na bank należący do mafii, którego głównym organizatorem był Joker. Niedługo po tym Joker zjawia się na konferencji bossów mafii, gdzie składa propozycję pozbycia się Batmana. Kiedy policja i prokuratura uderzają w zorganizowaną przestępczość w Gotham City, Joker zabija jednego z naśladowców człowieka-nietoperza i grozi, że jeśli prawdziwy Batman nie ujawni swojej tożsamości każdego dnia będzie zabijał kolejnych ludzi. Był to początek fali zamachów, których ofiarą padli m.in szef policji Gillian B. Loeb i sędzia Janet Surrillo. Na przyjęciu zorganizowanym przez Wayne'a złoczyńca próbuje także zabić Prokuratora Okręgowego Harveya Denta (Aaron Eckhart) i ukochaną Bruce'a Rachel Dawes (Maggie Gyllenhaal), jednak zostaje powstrzymany przez Batmana. Dzięki pomocy Denta, Batmanowi i policji udaje się ująć szaleńca, co jak się później okazało było przez niego zaplanowane. Kiedy Batman i Gordon próbują uratować porwanych przyjaciół, Joker ucieka z komisariatu. Rachel ginie, a Dent zostaje potwornie poparzony i przewieziony do szpitala. Później za sprawą Jokera, Dent sam staje się żądnym zemsty przestępca (Two-Face). Kolejne groźby terrorysty pogrążają miasto w anarchii. Na dwóch promach, wiozących ewakuowanych mieszkańców miasta oraz więźniów podkłada ładunki wybuchowe i na każdym z nich zostawia detonator, którym można wysadzić drugą łódź. Grozi, że jeśli do północy jedna z załóg nie podejmie decyzji, to on wysadzi obie łodzie. Batmanowi udaje się pokrzyżować plany złoczyńcy, jednak ten zdradza mu, że mimo porażki ma jeszcze jednego "asa w rękawie" – Harveya Denta, który zszedł na drogę przestępczą.
CIEKAWOSTKI NA TEMAT FILMU ;)
Sean Penn jako pierwszy otrzymał propozycję zagrania Jokera, lecz ją odrzucił. Poza nim kandydatami do roli Jokera byli: Crispin Glover, Lachy Hulme, Vincent Cassel, Mark Hamill, Johnny Depp, Paul Bettany, Robin Williams, Hugo Weaving, Sam Rockwell, Hugh Jackman, Adrien Brody oraz Michael Keaton. Mówiło się także o zainteresowaniu Paula Reubensa, aktora, który wystąpił w "Powrocie Batmana" jako ojciec Pingwina. Ostatecznie wybrano Heatha Ledgera.
Rolą Harveya Denta zainteresowani byli Hugh Jackman, Ryan Phillippe, Liev Schreiber, Jake Gyllenhaal oraz Josh Lucas. Propozycję wystąpienia w tej roli odrzucił Matt Damon. Natomiast Edward Norton zrezygnował z zagrania tej postaci ze względu na przyjęcie roli Bruce'a Bannera w filmie "Incredible Hulk".
Heath Ledger, przygotowując się do roli Jokera, otrzymał do przeczytania zeszyt "Batman: Zabójczy żart" autorstwa Alana Moore'a.
Heath Ledger zrezygnował z występu w ekranizacji książki "Dirt Music" autorstwa australijskiego pisarza Tima Wintona, na rzecz udziału w "Mrocznym rycerzu".
Heath Ledger tak bardzo przejął się postacią Jokera, którą gra, że napisał specjalny pamiętnik aby lepiej przygotować się do wczucia w swą rolę. Uwzględnił w nim szczegółowe cechy charakteru oraz wyglądu Jokera oraz choćby to, co odtwarzaną przez Ledgera postać rozśmiesza w życiu najbardziej. Ledger zamknął się również na 6 tygodni w hotelowym pokoju aby przygotować posturę ciała oraz odpowiedni głos do postaci Jokera.
To pierwszy raz, gdy Heath Ledger wciela się w postać czarnego charakteru (Joker).
Heath Ledger szukał inspiracji do odegrania roli Jokera m.in. w "Mechanicznej pomarańczy" (1971) Stanley'a Kubricka oraz historii życia Johna Simona Ritchiego (znanego jako Sid Vicious), niezwykle kontrowersyjnego, byłego basisty formacji "Sex Pistols"
Christian Bale przyznał w jednym z wywiadów, że podczas sceny przesłuchania Heath Ledger chciał, aby uderzał go tak mocno jak tylko mógł, żeby uzyskać jak najbardziej rzeczywiste odzwierciedlenie tej sceny.
Na planie zdjęciowym do filmu kostium aktorki Maggie Gyllenhaal zapalił się od generatora efektów specjalnych. Na pomoc aktorce rzucił się grający Jokera Heath Ledger. Dzięki niemu Maggie nie odniosła żadnych obrażeń. Aktorka z wdzięczności ucałowała Heatha, na co on odpowiedział: "Twój brat lepiej całuje".
Make-up Jokera jest połączeniem trzech kawałków odciśniętego silikonu, którego nałożenie na twarz Heatha zajmowało jedynie godzinę każdego dnia zdjęć. Ledger określił to jako "nową technologię, która jest znacznie szybsza od protetyki".
Podczas napisów końcowych pojawia się dedykacja ku pamięci Heatha Ledgera i Conwaya Wickliffe'a.
